從原理到實(shí)操，蝦青素抗肝纖維化實(shí)驗流程?。?）

3 C57小鼠肝纖維化模型每周監測
在肝纖維化模型建立過(guò)程中，每周系統監測小鼠的體重、活動(dòng)度及毛發(fā)狀態(tài)是評估模型進(jìn)展、藥物干預效果及動(dòng)物福利的關(guān)鍵環(huán)節。以下為具體操作流程及注意事項：

3.1 監測頻率與時(shí)間點(diǎn)

• 監測頻率：每周固定時(shí)間點(diǎn)（如每周一上午9:00-11:00）監測1次。

• 監測周期：

模型誘導期：DMN注射開(kāi)始至建模完成（通常4-6周）。  

干預治療期：給藥開(kāi)始至實(shí)驗終點(diǎn)（通常4-8周）。  

3.2 具體監測方法與記錄標準

3.2.1 體重稱(chēng)量

操作步驟：

1. 設備準備：使用精度0.1 g的電子天平，校準歸零。

2. 小鼠固定：

• 輕柔抓取小鼠尾部，將其置于專(zhuān)用稱(chēng)量盒（底部鋪濾紙防滑）。  

• 避免抓握腹部（可能加劇肝區疼痛）。  

3. 稱(chēng)量記錄：待數值穩定后記錄體重（單位：g），精確至小數點(diǎn)后1位。

4. 清潔消毒：每次稱(chēng)量后用75%酒精擦拭稱(chēng)量盒，防止交叉污染。  

5. 計算體重變化率} (%) = - }/} * 100%

6. 異常判定：

• 顯著(zhù)下降：連續2周體重降幅≥10%，或單周降幅≥15%。

• 顯著(zhù)上升：排除腹水后，體重增幅≥20%（可能提示代謝異常）。  

3.2.2 活動(dòng)度評估

觀(guān)察指標：

• 自主活動(dòng)：在開(kāi)放場(chǎng)（如30 cm×30 cm透明箱）中觀(guān)察5分鐘，記錄以下行為：

• 水平運動(dòng)：穿越區域次數（四肢全部進(jìn)入新區域計1次）。  

• 垂直探索：前肢離地站立次數（持續≥1秒）。  

• 靜止時(shí)間：無(wú)主動(dòng)移動(dòng)的累計時(shí)間（秒）。  

• 應激反應：抓取時(shí)掙扎強度（輕度/中度/劇烈）。

評分標準（參考改良的Murphy評分）：

記錄與處理：

評分≥2分且持續48小時(shí)，需考慮提前優(yōu)逝。

3.2.3 毛發(fā)狀態(tài)觀(guān)察

觀(guān)察指標：

• 毛發(fā)蓬松度：正常（緊貼皮膚） vs. 蓬松（豎立如“炸毛"）。

• 光澤度：光滑有光澤 vs. 暗淡無(wú)光。

• 脫毛區域：記錄脫毛部位（頭頸部、背部、腹部）及面積（直徑cm）。

• 皮膚損傷：紅斑、結痂、潰瘍等。

分級記錄：

• 1級異常：加強墊料清潔，補充維生素（如飲水中添加復合維生素B）。

• 2級異常：結合體重和活動(dòng)度評估，必要時(shí)終止實(shí)驗。

3.3 注意事項

1. 減少應激：

• 固定監測人員，操作輕柔，避免噪音干擾。  

• 稱(chēng)重與行為學(xué)觀(guān)察在不同時(shí)間段進(jìn)行（如上午稱(chēng)重，下午行為測試）。  

2. 環(huán)境控制：

維持SPF級環(huán)境（溫度22-24℃，濕度50-60%），避免環(huán)境波動(dòng)影響數據。  

3. 倫理閾值：

體重下降≥20%、活動(dòng)度評分≥2持續48小時(shí)或嚴重皮膚損傷，需立即啟動(dòng)優(yōu)逝程序。  

3.4 常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案

通過(guò)系統監測體重、活動(dòng)度及毛發(fā)狀態(tài)，可全面評估肝纖維化模型小鼠的生理狀態(tài)，為實(shí)驗結果的可靠性及倫理合規性提供保障。

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