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      認識黑膠蟲(chóng)的真面目(上)

      發(fā)布時(shí)間: 2022-01-04  點(diǎn)擊次數: 3791次

      江湖上流傳很久的黑膠蟲(chóng),到底真實(shí)身份是啥?

      今天讓我們一起來(lái)扒一扒~


      我們收集了全國29個(gè)黑膠蟲(chóng)污染樣本進(jìn)行DNA提取、測序、數據庫比對,得到了鑒定結果,一起和大家分享一下吧。



      表:黑膠蟲(chóng)檢定

      微生物種屬樣本數
      G+/G-形狀
      直徑大小
      Mycoplasma  hyorhinis
      (豬鼻支原體)
      3//0.15~0.3 μm
      Mycoplasma bovis
      (牛支原體)
      1//0.15~0.3 μm
      Mycoplasma pulmonis
      (鼠肺支原體株)
      1
      //0.15~0.3 μm
      Mycoplasma yeatsii
      (山羊支原體)
      6
      //0.15~0.3 μm
      Actinobacterium sp.
      (放線(xiàn)菌屬)
      1G+絲狀寬度近于桿狀細菌,直徑0.5~1 μm
      Ralstonia sp.
      (羅爾斯通菌屬)
      1G-桿狀1.2×2.5~3.5 μm
      Brevundimonas sp.
      (短波單胞菌屬)
      1G-桿狀0.4~0.5×1-2 μm
      Blastomonas natatoria
      (泳池芽殖單胞菌)
      1G-卵圓形或桿狀/
      Pseudomonas sp.
      (假單胞菌)
      1
      G-桿狀(0.5~1)×(1.5~4) μm
      Sphingobium sp.
      (鞘脂菌屬)
      1G-桿狀/
      Sphingomonas sp.
      (鞘氨醇單胞菌)
      5
      G-桿狀0.3~0.8×1.0~2.7 μm
      Methylobacillus sp.
      (甲基菌屬)
      1G-桿狀0.8~1.0×1.0~8.0 μm
      Microbacterium sp.
      (微桿菌屬)
      2G+桿狀1~10×0.2~0.6 μm
      Herbaspirillumhuttiense
      (赫氏草螺菌)
      4G-螺旋型長(cháng)度至數十微米;螺旋波長(cháng)為5~15 μm,螺旋幅度約一乃至數微米


      如上表格所示:在這29個(gè)樣本中,有11個(gè)樣本鑒定為支原體,種類(lèi)分別為豬鼻支原體、牛支原體、鼠肺支原體、山羊支原體。18個(gè)樣本鑒定為細菌,種類(lèi)分別為放線(xiàn)菌屬、羅爾斯通菌屬、短波單胞菌屬、泳池芽殖單胞菌、假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、甲基菌屬、微桿菌屬、赫氏草羅菌。



      支原體污染 


      本次實(shí)驗中,有11個(gè)樣本鑒定為支原體污染。首先,我們先來(lái)了解一下支原體的基本特征。

      逍鵬生物實(shí)驗室在做沉降菌檢測的時(shí)候,竟然出乎意外地培養出了一株支原體。支原體集落呈“荷包蛋樣":圓形,核心部分較厚,向下長(cháng)入培養基,周邊為一層薄的透明顆粒區。

      圖片

      圖1. 支原體菌落

      圖片

      圖2. 電鏡下的支原體

      圖源網(wǎng)絡(luò ),僅供參考學(xué)習用


      在電子顯微鏡下,支原體大小為0.15~0.3 μm,無(wú)細胞壁,不能維持固定的形態(tài)而呈現多形性,呈球形、球桿形、長(cháng)絲狀及分支狀等。


      豬鼻支原體  


      圖片

      圖3. 固體培養基上的豬鼻支原體集落

      圖源網(wǎng)絡(luò ),僅供參考學(xué)習用


      鑒定結果:樣本1,6,15 為 Mycoplasma hyorhinis(豬鼻支原體)

      大?。?.15~0.3 μm

      感染宿主:其感染豬的上呼吸系統的上皮細胞,通過(guò)口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴(無(wú)癥狀攜帶者)感染

      污染細胞途徑:推測胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取,純化獲得的結晶,再制成的凍干制劑,過(guò)濾除菌不當的胰酶溶液可能攜帶豬鼻支原體,建議大家買(mǎi)品牌胰酶,降低污染風(fēng)險


      鼠肺支原體  


      圖片

      圖4. 固體培養基上的鼠肺支原體株

      圖源網(wǎng)絡(luò ),僅供參考學(xué)習用


      鑒定結果:樣本12 為 Mycoplasma pulmonis(鼠肺支原體)

      大?。?.15~0.3 μm

      感染宿主:大鼠和小鼠是主要的宿主。寄生于呼吸道上皮頂膜,附著(zhù)感染從鼻前通道到肺泡的任何地方,可能是由表面糖蛋白介導的

      污染細胞途徑:在提取鼠源的細胞,例如鼠巨噬細胞,鼠肺動(dòng)脈上皮細胞,鼠原代海馬神經(jīng)元時(shí),如果提取的鼠帶有鼠肺支原體,就有可能會(huì )引入污染


      牛支原體  


      圖片

      圖5. 固體培養基上的牛支原體株

      圖源網(wǎng)絡(luò ),僅供參考學(xué)習用


      鑒定結果:樣本28 為 Mycoplasma bovis(牛支原體)

      大?。?.15~0.3 μm

      感染宿主:主要寄生于牛體內,感染部位廣泛,感染牛的呼吸道,會(huì )引起肺炎、中耳炎、關(guān)節炎、結膜炎

      污染細胞途徑:推測細胞增殖的主要營(yíng)養之一就是胎牛血清。胎牛血清來(lái)源于動(dòng)物,其主要通過(guò)0.1μm濾膜過(guò)濾除菌。如果血源及過(guò)濾除菌不當,就會(huì )給細胞帶來(lái)潛在的支原體污染,因此建議大家購買(mǎi)品牌的胎牛血清

      山羊支原體  //


      圖片

      圖6. 固體培養基上的山羊支原體株

      圖源網(wǎng)絡(luò ),僅供參考學(xué)習用


      鑒定結果:樣本9,10,17,18,19,20 為Mycoplasma yeatsii(山羊支原體)

      大?。?.15~0.3 μm

      感染宿主:主要寄生于山羊體內,感染部位廣泛,寄生于羊的外耳道,咽后淋巴結、肺、脾

      污染細胞途徑:此類(lèi)污染來(lái)源異常詭異,因為大家平時(shí)培養的細胞來(lái)源或營(yíng)養體系,很難接觸到此類(lèi)污染的環(huán)節,故很難推測到污染源頭。若培養相關(guān)的細胞或者使用相關(guān)的營(yíng)養體系,就比較容易推測污染來(lái)源了


      //  小結  //

      如果黑膠蟲(chóng)的真實(shí)身份是支原體,那么支原體本身不會(huì )游動(dòng),不符合黑膠蟲(chóng)污染活躍游動(dòng)或原地打轉、顫動(dòng)的特征,故推測可能細胞本身存在潛在的支原體污染,剛好被檢測出來(lái)了。


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