一句話(huà)知曉實(shí)驗方法怎么選？

在分子生物學(xué)實(shí)驗室里的玩法，無(wú)非就是用某種特定的刺激物（如細胞活素）去刺激一些細胞或組織，讓它們 high 起來(lái)，然后分析細胞對這些外源刺激物的反應，檢測細胞內哪條信號通路被激活或失活，或者什么蛋白被分泌出來(lái)。這里面就有很多種方法，哪種最合適，關(guān)鍵看你要檢測這個(gè)反應的哪個(gè)方面的特性。

WB 

建立蛋白質(zhì)的個(gè)人檔案 

一個(gè)典型的免疫印跡實(shí)驗（Western Blot，WB）可檢測信號通路中某種蛋白質(zhì)的特性、表達和分布，分析容量大、敏感度高、特異性強。但至于蛋白-蛋白相互作用則要用另一種更復雜的方法，即免疫共沉淀法（ Coimmunoprecipitation，Co-IP），它接近細胞內的生理情況，是以成為經(jīng)典方法。

SPR 

想知道 Ta 和 Ta 能有多親密？ 

表面等離子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）除了研究蛋白-蛋白相互作用（例如受體-配體相互作用），還有可研究小分子-蛋白或細胞-蛋白的相互作用。這種方法不需要標記蛋白（熒光標記或同位素標記），還可以實(shí)時(shí)定量分析這些相互作用的親和力、熱力學(xué)、動(dòng)力 學(xué)特性。SPR 是分析動(dòng)力學(xué)和親和力的金標準。

這些分析用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗（EenzymeLinked ImmunosorbentAssay，ELISA）也可以做，原理差不多。

PCR 

把小樹(shù)養大才能更好地招風(fēng) 

轉錄因子激活并和靶基因結合之后，該基因就被激活。PCR（Polymerase Chain Reaction）或Real Time PCR 可以把特定的 DNA 序列大幅擴增，便于檢測活性基因的表達情況。

ELISA 

追蹤到天涯海角！ 

如果要看看細胞外如何，比如細胞培養上清液或體液中的某種蛋白質(zhì)分泌情況，則通常選用 ELISA，從而獲知相應基因的活性。